Características clínico-epidemiológicas de pacientes coinfectados con el virus de inmunodeficiencia humana y leishmaniasis visceral que acuden al Instituto de Medicina Tropical, durante los años 2016 al 2020

RESUMEN La coinfección por leishmaniasis visceral y VIH es una preocupación mundial debido al ascenso progresivo en los últimos años, en varias regiones del mundo. La progresión de ambas enfermedades conducen al deterioro del sistema inmune, y como resultado, al fracaso terapéutico. El presunto estudio tiene como objetivo describir las características clínico-epidemiológicas de pacientes coinfectados con el virus de inmunodeficiencia humana y leishmaniasis visceral que acuden al Instituto de Medicina Tropical, en el periodo del 2016 al 2020. Es un estudio observacional, descriptivo, de corte transversal, utilizando registros médicos de pacientes con el diagnóstico de leishmaniasis visceral y VIH. Se incluyeron 51 pacientes coinfectados, entre 19 y 65 años, 42 del sexo masculino (82,3 %); 37 procedentes del área Central. Los hallazgos clínicos mas frecuentes fueron el decaimiento del estado general y la fiebre. La mayoría de los pacientes tuvieron un recuento bajo de linfocitos tCD4 y valores elevados de carga viral de VIH. Nuestro trabajo contribuye a conocer el perfil epidemiológico de pacientes coinfectados para mejorar el diagnóstico temprano y consecuentemente el tratamiento médico precoz.

ABSTRACT Co-infection by visceral leishmaniasis and HIV is a global concern due to the progressive rise in recent years, in various regions of the world. The progression of both diseases leads to the deterioration of the immune system, and as a result, to therapeutic failure. The presumed study aims to describe the clinical-epidemiological characteristics of patients co-infected with the human immunodeficiency virus and visceral leishmaniasis who attend the Institute of Tropical Medicine, in the period from 2016 to 2020. It is an observational, descriptive, cross-sectional study, using medical records of patients diagnosed with visceral leishmaniasis and HIV. 51 coinfected patients were included, between 19 and 65 years old, 42 male (82.3%); 37 from the Central area. The most frequent clinical findings were a weakness and fever. Most of the patients had a low tCD4 lymphocyte count and high HIV viral load values. Our study contributes to knowing the epidemiological profile of coinfected patients to improve early diagnosis and consequently early medical treatment.

Diversidad genética de aedes aegypti en el eje transfronterizo Central-Alto Paraná en Paraguay / Genetic diversity of Aedes aegypti in the central-upper Paraná Cross-Border axis in Paraguay

RESUMEN Objetivos: Conocer la diversidad genética de Aedes aegypti en el corredor vial transfronterizo Central-Alto Paraná de Paraguay, con registros de casos de dengue. Materiales y métodos: Se seleccionaron veinte hembras adultas de la eclosión de huevos de Ae. aegypti procedentes de casas geolocalizadas en los departamentos de Alto Paraná, Caaguazú, Cordillera y Central, entre el 2018 y 2019. Se extrajo ADN del tejido de las hembras para amplificación aleatoria de sus patrones polimórficos mediante amplificación aleatoria del ADN polimórfico por PCR (RAPD-PCR), usando cebadores H3 y B03 a fin de conocer parámetros genéticos de diversidad poblacional. Las relaciones entre las poblaciones de mosquitos según la localidad fueron visualizadas mediante análisis no apareado de la media aritmética. Las áreas idóneas de distribución geográfica real y potencial de estas poblaciones de Ae. aegypti fueron analizadas mediante DIVA-GIS 7.3.0 y MAXENT. Resultados: Se identificaron 40 loci mediante perfiles RAPD-PCR, con diferenciación génica moderada (Gst = 0,12). El corredor transfronterizo presentó condiciones bioclimáticas para la presencia de poblaciones variantes de Ae. aegypti, siendo determinantes en la distribución la precipitación del trimestre más cálido y la temperatura media del trimestre más seco. Conclusiones: Se evidencia que existe diversidad genética moderada en las poblaciones de Ae. aegypti procedentes de zonas con registros de casos de dengue ubicadas en el corredor vial transfronterizo que une los departamentos Central y Alto Paraná de Paraguay. El estudio de variabilidad genética de Ae. aegypti es de gran utilidad para la vigilancia entomoepidemiológica y evaluación de posibles eventos de resistencia al control químico.

ABSTRACT Objective: To determine the genetic diversity of Aedes aegypti in the Central-Alto Paraná cross-border road corridor of Paraguay, an area that has reports of dengue cases. Materials and methods: Twenty adult females were selected from hatching Ae. aegypti eggs from households geolocated in the departments of Alto Paraná, Caaguazú, Cordillera and Central, between 2018 and 2019. DNA was extracted from the tissue of females for amplifying their polymorphic patterns by random amplification of polymorphic DNA by PCR (RAPD-PCR), using primers H3 and B03 in order to identify genetic parameters of population diversity. The relationships between mosquito populations according to locality were observed by unpaired arithmetic mean analysis. We used DIVA-GIS 7.3.0 and MAXENT to analyze the suitable areas of actual and potential geographic distribution of these Ae. aegypti populations. Results: Forty loci were identified by RAPD-PCR profiling, with moderate gene differentiation (Gst = 0.12). The cross-border corridor presented bioclimatic conditions for the presence of variant populations of Ae. aegypti, with precipitation in the warmest quarter and mean temperature in the driest quarter being determinant in the distribution. Conclusions: There is evidence of moderate genetic diversity in Ae. aegypti populations from areas that have reported dengue cases in the cross-border road corridor linking the Central and Alto Paraná departments of Paraguay. The study of genetic variability of Ae. aegypti is very useful for entomo-epidemiological surveillance and evaluation of possible resistance to chemical control.

Características clínico-epidemiológicas de leishmaniasis visceral canina en un área endémica de Paraguay / Clinical-epidemiological characteristics of visceral leishmaniasis in dogs from an endemic area in Paraguay

RESUMEN Objetivo Describir las características clínico-epidemiológicas asociadas a la transmisión de leishmaniosis visceral canina en un área endémica del departamento de Caaguazú, Paraguay. Materiales y Métodos El estudio fue descriptivo observacional, de corte transversal. Se evaluaron 324 caninos seleccionados de 110 viviendas. Se realizó el examen clínico; se obtuvo aspirado de ganglio para el examen directo y muestra de sangre para la posterior detección de anticuerpos anti-Leishmania revelados en tiras inmunocromatográfias. Resultados El 4,9% de la población canina dio positivo con antígeno recombinante rK39. Por la técnica de tinción con Giemsa, se obtuvo 4,3% de canes positivos, de los cuales 37,5% presentaron signos clínicos evidentes. Los signos más frecuentes encontrados en los perros infectados fueron adelgazamiento, onicogrifosis y alopecia (25%). La seroprevalencia fue mayor en perros entre 2 y 4 años de raza mestiza. Conclusiones Los signos clínicos presentes confirmaron la infección parasitaria y el hallazgo indica el rol de los caninos en la epidemiologia de la leishmaniosis en Caaguazú, así como el riesgo que representan para la transmisión. Los resultados obtenidos podrían ayudar a formular un sistema de monitoreo y contribuir con la vigilancia de la leishmaniosis canina en la zona.

ABSTRACT Objective To describe the clinical-epidemiological characteristics associated with the transmission of visceral leishmaniasis in dogs in an endemic area from Caaguazú department, Paraguay. Materials and Methods Cross-sectional study that included 324 dogs from 110 houses. Clinical examination was performed; ganglion aspirate was obtained for direct exa-mination and blood sample for further detection of anti-Leishmania antibodies by rk39 recombinant antigen immunochromatographic strips. Results 4.9% of the canine population resulted positive for rk39 recombinant antigen. By the Giemsa staining technique, 4.3% of positive dogs were obtained, of which 37.5% presented evident clinical signs. The most frequent signs found in infected dogs were thinning, onychogryphosis and alopecia (25%). Seroprevalence was higher in mixed breed dogs between 2 and 4 years old. Conclusion The clinical signs confirmed the parasitic infection, and the finding indicates the role of canines in the epidemiology of leishmaniasis in Caaguazú as well as the risk that they represent for transmission. These results may help to formulate a monitoring system and contribute to the surveillance of canine leishmaniasis in the zone.

Estandarización de la técnica de PCR-RFLP de la región ITS1, para la caracterización molecular de leishmania (L) infantum, en muestras caninas / Standardization of PCR-RFLP technique of the ITS-1 region for leishmania (L) infantum molecular characterization in canine samples

La leishmaniasis es una enfermedad producida por protozoarios parásitos del género Leishmania. Estos parásitos infectan a hospedadores mamíferos, entre los cuales los perros han sido implicados como reservorios del parásito. Este trabajo planteó estandarizar la técnica de la PCR-RFLP luego de la amplificación de la región ITS1 de Leishmania spp, como herramienta útil para la detección y caracterización molecular. Se utilizaron promastigotes de cultivo y muestras de biopsias procedentes de perros con leishmaniasis visceral previamente diagnosticados en el Centro Antirrábico Nacional. La región ITS1 del ADN genómico nuclear de Leishmania spp. fue amplificada utilizando los cebadores LITSR y L5,8S. La técnica ITS1 PCR-RFLP aplicada, permitió la detección de Leishmania (L) infantum en 10/10 aislados de parásitos mantenidos en medio NNN, en 10/18 muestras de bazo y 10/18 muestras de ganglio linfático poplíteo. Las condiciones óptimas de reacción fueron 0,2 mM de dNTPs, 0,1 pmol de cada cebador y 1U de Taq polimerasa. La sensibilidad de la PCR fue de 3 ng/µL de ADN en aislados de cultivo NNN y 60 ng/µL de ADN en muestras de biopsias, mientras que la especificidad fue de 100% para la detección de Leishmania sp. La enzima de restricción Hae III, determinó fragmentos de 184, 72 y 55 pb., que resultaron específicos para la especie Leishmania (L.) infantum. El marcador utilizado resultó confiable para la detección y caracterización de Leishmania sp. en perros procedentes de zonas endémicas, lo cual podría ser útil para verificar las especies de parásitos circulantes entre los perros.

Leishmaniasis is a disease caused by protozoan parasites of the genus Leishmania. The separasites infect to mammalian hosts, including canines that have been implicated as reservoirs of the parasite. The aim of this research was to standardize the technique of PCR RFLP after amplification of the ITS1 region of Leishmania (Leishmania) infantum, as a useful tool for detection and molecular characterization. Promastigotes from culture and biopsies from dogs with visceral Leishmaniasis previously diagnosed by the Centro Antirrábico Nacional. The ITS1 region of the genomic DNA of Leishmania sp. was amplified using LITSR and L5,8S primers. The technique ITS1 PCR-RFLP applied, allowed the detection of Leishmania (L.) infantum in 10/10 of the isolates from parasites maintained in NNN culture medium, in 10/18 samples from spleen and 10/18 samples from popliteal lymph node. Optimal reaction conditions were 0.2 mM dNTPs, 0.1 pmol of each primer and 1U of Taq polymerase. The sensitivity of PCR was 3 ng/µL DNA in isolates of parasites from NNNculture medium and 60 ng/µL DNA in biopsy samples while the specificity was 100% for the detection of DNA of Leishmania sp. The restriction enzyme Hae III determined fragments of184, 72 and 55 bp., which were specific to Leishmania (L.) infantum. The marker used isreliable for the detection and characterization of Leishmania sp. in dogs from endemic areas, which could be useful to verify the species of parasites circulating among animals.